食用菌培养基的消毒与灭菌是两个不同的概念。消毒是通过物理或化学方法杀死或除去部分微生物,如病原微生物、微生物营养体等,而对于芽孢或孢子则不起作用,因此它是部分和表面的;而灭菌是通过物理或化学方法杀死或除去所有的微生物,因此它是全部和彻底的。近期有种植灵芝的网友咨询耕种帮:灵芝培养基如何用化学方法消毒?培养基化学方法方法有几种?
化学方法消毒指应用某些化学药品,抑制或杀死微生物的方法。通常将能破坏、杀灭微生物及芽孢的物质作为灭菌剂,而抑制其生长的物质作为抑菌剂或防腐剂。它们间的区分不是绝对的,若将灭菌剂的浓度降低就可成为抑菌剂或防腐剂或变为完全无效,浓度稍高些为消毒剂。
灵芝常用消毒剂及用法
1、乙醇(酒精):使用浓度为75%,用95%乙醇100毫升,加水29.66毫升,可用作皮肤、器皿、接种工具及分离材料表面擦拭消毒,加1%硫酸或氢氧化钠可增效。
2、来苏儿(煤酚皂液):使用浓度为3%~5%,取原液10毫升,加水100~167毫升,可用作空间、菇床、器皿等表面消毒。
3、甲醛溶液(福尔马林):使用浓度为5%或原液每立方米10毫升,用35%原液100毫升加水600毫升,可用作5%溶液空间、床架喷雾。原液加热或加等量高锰酸钾熏蒸。
4、高锰酸钾(灰氧锰、PP粉):使用浓度为0.1%,1克加水1000毫升,可用作器皿、塑料薄膜等消毒。
4、过氧乙酸(氧醋酸、过乙酸):使用浓度为0.2%~0.5%,100毫升水中加市售20%过氧乙酸1~2.5毫升,可用作空间喷雾、室内熏蒸或擦拭、浸泡消毒。
5、漂白粉(氯石灰):使用浓度为3%,取30克加水970毫升,可用作地面、空间喷雾消毒。
6、硫酸铜(胆矾):使用浓度为5%,取5克加水95毫升,可用作于段木杂菌局部涂刷。
7、硫磺(硫):每立方米空间15~20克,直接置玚瓦片或废旧盆罐内点燃应用,可用作培养室、接种室、菇棚等熏蒸消毒。
8、甲基托布津:使用浓度为1:800倍,0.5千克药剂加水400升调制成悬浊液,或按料重称量后加一定量水,成悬浊液,可用作拌料或喷洒床畦消毒。
9、多菌灵:使用浓渡为1:500倍,加水制成悬浊液,可用作拌料或喷洒床畦消毒。
10、波尔多液:使用浓度为硫酸铜、石灰和水三者比为1:1:100~200,可用作菇房地面、床架等喷涂消毒。
影响化学消毒效果的因素
1、湿度:一般湿度越大,杀菌效果越好。如硫磺熏蒸消毒时,若被消毒物品处于干燥情况下,杀菌效果不理想,当用水喷湿后效果显著提高。
2、温度:温度高效果好。如苯酚、来苏儿加热至40度以上杀菌作用明显增强。
3、微生物种类:一般中温型类群的微生物,杀菌温度要高于低温型类群,而低于高温型类群。孢子、芽孢对高温、干燥及化学药剂的抵抗力要高于营养体细胞。
4、时间和剂量:一般作用时间越长,效果越好,在致死剂量范围内,剂量增加,杀菌时间可减少,反之则需延长。
5、微生物数量:培养基中微生物数量多,应该延长杀菌时间和增加剂量。
6、培养剂的成分:培养基中加入某些有机质,如肉汤中加入3%的干酵母粉,苯酚的杀菌力将减弱30%;细菌悬液加糖、蛋白质等,它对菌体将起到不同程度的保护作用,减弱药物的杀菌效果。
除此,还必须明确,任何一种化学消毒剂不可能对各类杂菌均有等同的杀菌能力,因此需几种消毒剂配合、交替应用或配伍应用,以促进增效作用,提高杀菌力,减少抗药性或耐药性菌体的产生,缩短消毒时间,维持药效的稳定和增溶。如新洁尔灭用于器具表面消毒并不理想,若加入半量的酒精则增强其杀菌效果,前者破坏细胞膜,后者进入菌体;漂白粉中加氯化铵,能增强杀菌效力,它被称为漂白粉的活性溶液。消毒药剂配制时称量应精确,不用盐类、有机物及杂质硬水,要求现配现用。如过氧乙酸稀释时需用纯过氧乙酸计算、配制,它的性质很不稳定,加水后易失效;多菌灵使用时先用少量酒精助溶再加水稀释;石灰消毒需采用质地纯、未风化、新制的块灰为好,因为潮解变成碳酸钙而失去作用;漂白粉水溶液中含有大量氢氧化钙,配制溶液时若浓度过高,pH上升杀菌效果反而减弱。以上均是使用消毒剂时所值得注意的。