灵芝和其他食药用菌一样,对于病虫害及杂菌的防治是灵芝生产中的重要环节,因此在灵芝的分离、培养和生产中需要使用高压灭菌器进行杀菌处理,近期有网友咨询耕种帮:灵芝在分离、培养和生产中使用高压灭菌器时需要注意什么?
灵芝的分离、培养和生产过程用高压灭菌器时注意事项
1、按照灭菌器要求的注水量,加水到指定的标度,最好加入开水,一方面可缩短升温时间,同时避免长期使用冷水锅内结水碱。
2、将需要灭菌的培养基或器物放在灭菌器内。装入的试管、菌种瓶等物不宜过挤,以利热蒸汽流通,特别是袋装培养基不能叠放紧压,妨碍蒸汽渗透,造成灭菌不彻底。需灭菌的器物装好后,将灭菌器的盖密封,不能漏气,然后打开放气阀门。
3、接通电源或打开锅炉的进汽阀门加热。
4、排除干净锅内的冷空气,是高压灭菌最重要又容易被人忽略的步骤。空气的导热性能要比水蒸气差,潜热很小,但其热膨胀系数较大,灭菌锅内存有较多的冷空气。因此,灭菌时排出锅中的冷空气非常必要。排放冷空气的方法有两种,一种是当水加沸腾后空气由已打开的放气阀门排出,等蒸汽从气门有力地冲出后,说明空气已排完,可关闭气门继续加热;另一种方法是加热后不开气门,当气压表的指针上升到0.5千克/厘米2时,打开放气阀门,排出冷空气,指针降至零后,再关上放气阀继续加热。
5、当压力上升到所需要的指标后,开始计算灭菌时间,灭菌过程中保持压力稳定,不能忽高、忽低,特别应该注意安全阀门,如果安全阀失灵,当压力超过灭菌器最大的承受能力,会出现意外事故。
6、达到灭菌要求的时间后,关掉热源停止加热,排出蒸汽使压力慢慢下降。排气的速度应适当。若排得太快,增大瓶内外的压力差,灭菌器中试管或三角瓶中的培养基会突然沸腾,冲脱瓶塞或沾污棉花塞;排得太慢,等于延长了灭菌时间,对一些培养基是不利的。琼脂试管培养基和液体培养基,灭菌后去掉热源,让其自然排气,当压力表指针降至零时方可打开锅,一般来说,从排气到打开灭菌锅的时间约为8~12分钟。塑料袋培养料灭菌时,应让其自然冷却,当压力下降到0.5千克/厘米2时,再打开排气阀门放气,以免在减压过程中,袋内外产生压力差,击穿塑料袋导致污染杂菌。
7、防止弄湿棉塞。灭菌前应将试管的棉花塞用油纸或塑料薄膜包好,灭菌时瓶子的棉塞不能接触灭菌锅壁,瓶子上面应盖铝帽或防水油纸,以免锅盖内面的水流到棉塞上。若棉塞潮湿,可在锅中烘烤一定时间再出锅。